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186 人阅读发布时间:2026-03-15 23:53
【促销时间】2026年3月15日 — 2026年9月15日(共6个月,限时优惠!)
【产品信息】
产品名称:人NK细胞白血病细胞(YT)
规格:1×10⁶cells/T25培养瓶
目录价:3000元
促销价:1500元(5折优惠!)
【产品应用与优势】
YT是来源于人白血病患者的NK细胞系,STR鉴定正确,具有独特的IL-2非依赖性生长特征(区别于大多数NK细胞系),CD56+/CD3-/CD16+,含功能性穿孔素和FasL,是研究NK细胞天然杀伤机制和NK细胞白血病生物学的全球经典工具。主要应用方向:NK细胞穿孔素/颗粒酶B依赖性细胞毒机制与FasL/Fas途径相对贡献的量化研究;IL-2非依赖性NK细胞增殖信号(JAK-STAT5/PI3K-AKT持续激活)分子机制分析;NK细胞对肿瘤靶细胞(K562/Daudi)识别杀伤中NKG2D/NKp30/NKp46活化受体与KIR抑制受体的平衡调控研究;以及肿瘤免疫逃逸机制——MHC-I上调、PVR/Nectin-2 Tigit配体表达对NK细胞杀伤的抑制分析。
【质量保证】
STR鉴定正确,CD56+/CD3-/CD16+表型确认,NK细胞来源可靠
IL-2非依赖性生长,无需外源IL-2维持,操作便利,批间稳定性好
穿孔素/颗粒酶B高表达,FasL阳性,双途径细胞毒活性完整
对K562靶细胞(MHC-I低表达)天然杀伤活性强(效靶比5:1时杀伤率>50%)
【实验流程示意】
① 细胞培养:RPMI-1640 + 20% FBS,37°C/5% CO₂;悬浮培养(IL-2非依赖),每2-3天传代,维持密度5×10⁵~2×10⁶/mL,传代比例1:3。
② NK细胞双途径细胞毒机制研究:靶细胞K562(MHC-I阴性)/Daudi(MHC-I阳性)CFSE标记 → YT细胞按效靶比(1:1 / 5:1 / 10:1)混合孵育4h → 流式检测靶细胞死亡率(PI+CFSE+)→ 穿孔素/颗粒酶途径阻断:EGTA+MgCl₂(5mM)钙螯合处理 → FasL途径阻断:抗FasL中和抗体(1μg/mL)预处理1h → 分别计算各途径贡献比例(穿孔素途径 vs FasL途径)。
③ NK细胞活化受体功能验证:抗NKG2D(1F12,10μg/mL)/抗NKp46(10μg/mL)封闭抗体预处理YT细胞1h → 与K562靶细胞共培养 → 流式检测各受体封闭后杀伤活性下降程度 → Western Blot检测受体激活后ERK1/2/AKT/ZAP70磷酸化水平 → 验证各活化受体对杀伤信号传导的贡献。
④ 肿瘤免疫逃逸模型:IFN-γ(100ng/mL)处理靶细胞K562 48h → 流式检测MHC-I(HLA-ABC)表达上调水平 → IFN-γ处理前后与YT共培养杀伤率对比 → KIR封闭实验(抗KIR2DL1/KIR2DL3抗体,10μg/mL)→ 验证MHC-I上调通过KIR抑制受体降低NK杀伤活性的逃逸机制 → TIGIT配体(PVR/Nectin-2)表达检测及抗TIGIT抗体对NK杀伤的恢复效果。
【参考文献】
[1] Yodoi J, et al. TCGF (IL 2)-receptor inducing factor(s). I. Regulation of IL 2 receptor on a natural killer-like cell line (YT cells). J Immunol. 1985;134(3):1623-1630.
[2] Lanier LL. NK cell recognition. Annu Rev Immunol. 2005;23:225-274.
[3] Shimasaki N, et al. NK cells for cancer immunotherapy. Nat Rev Drug Discov. 2020;19(3):200-218.
【售后服务保障】
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