TNFR1和TNFR2双基因敲除THP-1细胞在TNF信号通路研究中的实验案例

TNFR1和TNFR2双基因敲除THP-1细胞在TNF信号通路研究中的实验案例

TNFR1和TNFR2是肿瘤坏死因子TNF-α的两种受体，分别介导促炎和促生存信号。TNFR1通过死亡结构域激活NF-κB和凋亡通路，TNFR2主要通过TRAF2激活非经典NF-κB通路。TNFR1/TNFR2双基因敲除THP-1细胞为解析TNF信号在单核细胞中的功能提供了完整的缺失模型。本实验案例评估TNF受体双敲除对炎症信号和细胞死亡的调控。

一、TNF受体的信号调控

TNFR1是TNF-α的主要信号转导受体，广泛表达于多种细胞，而TNFR2主要在免疫细胞和内皮细胞表达。Yang（2026）系统综述了坏死性凋亡的调控机制，Dilsiz（2026）揭示了酪氨酸磷酸化在死亡受体信号中的调节作用。在单核细胞中，TNFR1/TNFR2协同调控炎症因子产生和细胞存活。

二、实验案例

1. TNF-α刺激响应缺失验证：用重组TNF-α刺激双敲除THP-1细胞，检测NF-κB核转位和IκBα降解情况，确认信号通路的完全阻断。

2. 炎症因子释放谱：双敲除THP-1经LPS刺激后，IL-6、IL-8和TNF-α的释放量显著降低，提示TNF自分泌环路被阻断。

3. 细胞凋亡与坏死性凋亡：在SMAC类似物和z-VAD-fmk联合处理下，双敲除细胞对坏死性凋亡诱导的敏感性降低。

4. 单核细胞分化影响：评估TNF受体缺失对PMA诱导THP-1向巨噬细胞分化的影响。

三、订购信息

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参考文献

1. Poffenberger, et al. PMID:42498936, 2026.

2. Yang, et al. PMID:42481848, 2026.

3. Dilsiz, et al. PMID:42475758, 2026.