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7 人阅读发布时间:2026-07-27 22:25
hC1QA/hC1QB/hC1QC基因敲除THP-1细胞在补体系统与免疫调控研究中的技术方案
C1q是补体经典激活途径的起始分子,由C1QA、C1QB、C1QC三条链组装形成。C1q在吞噬作用、免疫清除和炎症调控中发挥核心作用。hC1QA/hC1QB/hC1QC三基因敲除THP-1细胞为研究补体系统在单核细胞免疫功能中的调控作用提供了独特模型。本文提出基于C1q三链敲除THP-1细胞的技术方案,评估补体缺失对巨噬细胞极化和炎症因子释放的影响。
一、C1q的免疫调控机制
C1q不仅启动补体级联反应,还作为模式识别分子直接参与凋亡细胞清除和自身免疫耐受。在单核/巨噬细胞中,C1q调控M1/M2极化平衡。Khan(2026)在突触核蛋白病研究中发现C1q介导的补体系统在早期神经炎症中的异常激活,Jie(2026)通过单细胞RNA-seq揭示了C1q在肿瘤微环境中的预后价值。
二、技术方案
1. 三基因敲除验证:采用Western blot和补体活性检测(CH50法)确认C1q三链蛋白的完全缺失和补体活性丧失。
2. 巨噬细胞极化实验:将C1q敲除THP-1用PMA诱导分化为巨噬细胞后,分别用LPS+IFN-γ(M1)或IL-4+IL-13(M2)极化,检测CD80/CD86和CD206表达比例。
3. 凋亡细胞吞噬实验:用CFSE标记的凋亡Jurkat细胞评估C1q缺失对巨噬细胞吞噬效率的影响。
4. 炎症因子谱分析:通过Luminex多因子检测评估C1q敲除巨噬细胞的基础和刺激后炎症因子释放谱。
三、订购信息
本文涉及的hC1QA/hC1QB/hC1QC基因敲除THP-1细胞由上海淳麦生物科技有限公司提供,更多产品信息请访问官网:www.shcmbio.com,欢迎联系咨询:4006815880。
参考文献
1. Khan, et al. PMID:42477211, 2026.
2. Jie, et al. PMID:42468280, 2026.
3. Lozano, et al. PMID:42465430, 2026.