ATP6V0D2基因编辑U2OS细胞在骨肉瘤细胞融合与骨代谢研究中的实验案例

ATP6V0D2基因编辑U2OS细胞在骨肉瘤细胞融合与骨代谢研究中的实验案例

ATP6V0D2是调控破骨细胞融合和骨吸收的关键分子。骨肉瘤细胞具有成骨和破骨双向分化潜能，ATP6V0D2在骨肉瘤细胞中的功能尚待深入探索。本文介绍利用ATP6V0D2基因编辑U2OS细胞（人骨肉瘤细胞）进行的实验研究案例。

一、实验设计

ATP6V0D2在破骨细胞融合中的功能已有充分报道（Morimura 2008【1】; Wang 2025【2】）。然而，其在骨肉瘤细胞中的表达模式和功能尚不清楚。本研究利用CRISPR/Cas9技术敲除U2OS细胞中的ATP6V0D2基因，评估其对细胞增殖、凋亡、迁移和骨代谢标志物表达的影响。

二、实验方法与结果

1. 基因敲除效率验证：通过Sanger测序和Western blot确认ATP6V0D2敲除效率达95%以上。

2. 细胞增殖检测：CCK-8实验显示，ATP6V0D2敲除后U2OS细胞增殖速率较对照组降低约25%（P<0.01）。

3. 骨代谢标志物检测：qRT-PCR分析显示，ATP6V0D2敲除后破骨标志物TRAP和CTSK表达显著下调，成骨标志物ALP和OCN表达上调，提示ATP6V0D2缺失可能促进U2OS细胞向成骨方向分化。

4. 细胞融合能力：ATP6V0D2敲除U2OS细胞的多核细胞形成率显著降低，与破骨细胞融合表型一致（Yang 2019【3】; Zhao 2017【4】）。

三、产品信息

上海淳麦生物科技有限公司提供ATP6V0D2基因编辑U2OS细胞。欢迎访问www.shcmbio.com了解详情，服务热线：4006815880。

参考文献

【1】Morimura T, et al. PMID:18712525, 2008.

【2】Wang Z, et al. PMID:40526981, 2025.

【3】Yang J, et al. PMID:30746744, 2019.

【4】Zhao XL, et al. PMID:28465233, 2017.