PC3细胞ATP6V0D2基因过表达细胞株 | 前列腺癌V-ATPase功能研究应用方案

一、产品概述

PC3细胞ATP6V0D2基因过表达细胞株是在人前列腺癌细胞系PC3基础上，通过慢病毒介导的基因过表达技术构建的稳定细胞株。ATP6V0D2编码V-ATPase的d2亚基，在肿瘤细胞酸性微环境维持和骨转移过程中发挥重要作用。前列腺癌骨转移是临床常见问题，V-ATPase介导的骨溶解是转移灶形成的关键环节。

二、技术方案

2.1 基因功能背景

ATP6V0D2参与破骨细胞分化过程中的溶骨作用。Zhao等人研究发现，秦皮素（Aesculin）可通过抑制RANKL诱导的RAW264.7细胞破骨分化，下调TrapÀ�Atp6v0d2、Cathepsin Ke��Mmp-9等破骨相关基因表达（PMID: 28465233）。此外，ATP6V0D2在多种肿瘤中表达异常，参与EMT和能量代谢调控。

2.2 构建策略

本细胞株采用慢病毒感染法将ATP6V0D2编码序列导入PC3细胞，经嘌呤霉素筛选获得稳定过表达株。构建流程包括：基因克隆→慢病毒包装→感染PC3细胞→抗生素筛选→单克隆扩大培养→STR鉴定及过表达验证。

2.3 验证方法

通过qRT-PCR检测ATP6V0D2 mRNA表达水平，Western blot验证蛋白过表达效果。细胞经STR鉴定确保细胞身份正确，支原体检测确保无污染。

三、实验案例

3.1 ATP6V0D2在破骨分化与骨代谢中的作用

Zhao等人研究发现，秦皮素可剂量和时间依赖性地抑制RANKL诱导的RAW264.7细胞破骨分化，TRAP染色证实破骨细胞数量减少。同时，Trap、Atp6v0d2、Cathepsin K和Mmp-9等破骨相关基因表达下调。机制研究显示秦皮素通过抑制MAPK和NF-κB信号通路降低Nfatc1 mRNA表达。在卵巢切除和地塞米松处理的大鼠骨质疏松模型中，秦皮素可有效防止骨量丢失（PMID: 28465233）。

3.2 ATP6V0D2在食管癌中的促癌功能

Qi等人研究显示ATP6V0D2在食管癌细胞系中表达升高，通过调控EMT、细胞周期和凋亡相关标志物促进肿瘤发生（PMID: 32240421）。

3.3 ATP6V0D2与Kras驱动癌症能量代谢

Yang等人发现在KrasG12D驱动细胞中ATP6V0D2显著上调，敲低后抑制细胞运动和侵袭（PMID: 30746744）。

四、产品应用

1. 前列腺癌骨转移研究：利用PC3-ATP6V0D2过表达细胞株，研究V-ATPase在前列腺癌骨转移溶骨过程中的作用。

2. 肿瘤微环境酸化与侵袭研究：探究ATP6V0D2过表达对前列腺癌细胞外酸化和侵袭能力的影响。

3. V-ATPase靶向药物筛选：筛选靶向ATP6V0D2/V-ATPase的前列腺癌治疗化合物。

4. 破骨细胞-肿瘤细胞互作研究：分析ATP6V0D2在前列腺癌与骨微环境相互作用中的功能。

5. EMT与转移机制研究：研究ATP6V0D2对前列腺癌EMT和转移的调控作用。

五、参考文献

[1] Zhao XL, Chen LF, Wang Z. Aesculin modulates bone metabolism by suppressing receptor activator of NF-κB ligand (RANKL)-induced osteoclastogenesis and transduction signals. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2017, 488(1): 15-21. 主要研究：秦皮素通过抑制Atp6v0d2等破骨相关基因表达调控骨代谢。

[2] Qi M, Liu DM, Ji W, et al. ATP6V0D2, a subunit associated with proton transport, serves an oncogenic role in esophagus cancer and is correlated with epithelial-mesenchymal transition. Esophagus, 2020, 17(4): 456-467. 主要研究：ATP6V0D2在食管癌中通过调控EMT促进肿瘤进展。

[3] Yang J, Guo F, Yuan L, et al. Elevated expression of the V-ATPase D2 subunit triggers increased energy metabolite levels in KrasG12D-driven cancer cells. Journal of Cellular Biochemistry, 2019, 120(7): 11690-11701. 主要研究：ATP6V0D2在Kras突变癌症中的表达上调及功能。

六、产品信息

产品名称：PC3细胞ATP6V0D2基因过表达细胞株

规格：T25/冻存管

产品来源：上海淳麦生物科技有限公司

官方网站：www.shcmbio.com

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