【产品应用案例】人结肠癌耐奥沙利铂细胞株 HCT8/L 的实验方案与应用

【产品应用案例】人结肠癌耐奥沙利铂细胞株 HCT8/L 的实验方案与应用

 

一、产品概述

 

产品名称：人结肠癌耐奥沙利铂细胞株 HCT8/L

产品来源：安元生物科技（南京）有限公司

供应商：上海淳麦生物科技有限公司

公司网站：www.shcmbio.com

服务热线：4006815880

 

产品简介：

HCT8/L 是人结肠癌奥沙利铂耐药细胞株，通过逐步增加奥沙利铂浓度诱导建立。该细胞株具有稳定的耐药表型，是研究结直肠癌化疗耐药机制、筛选逆转耐药药物的理想模型。

 

二、技术方案

 

2.1 细胞培养方案

 

培养基：RPMI-1640 培养基

补充成分：10% 胎牛血清（FBS）、1% 青霉素-链霉素

培养条件：37℃、5% CO₂、饱和湿度

传代比例：1:3 至 1:5

维持药物浓度：建议在培养基中添加 1-2 μmol/L 奥沙利铂以维持耐药表型

 

2.2 耐药性验证方案

 

步骤：

1. 取对数生长期的 HCT8/L 细胞接种于 96 孔板

2. 设置奥沙利梯浓度梯度：0.1、0.5、1、2、5、10、20、50 μmol/L

3. 培养 72 小时后，采用 CCK-8 法检测细胞活力

4. 计算 IC₅₀ 值，与亲本 HCT-8 细胞对比

 

预期结果：

HCT8/L 细胞的 IC₅₀ 值应显著高于亲本细胞（通常提高 5-10 倍）

 

三、实验案例

 

案例一：KPT-330 逆转奥沙利铂耐药研究

 

实验目的：探索 Exportin 1 抑制剂 KPT-330 对 HCT8/L 细胞奥沙利铂耐药的逆转作用

 

实验设计：

- 细胞模型：HCT8/L 奥沙利铂耐药细胞株

- 药物处理：KPT-330 单独处理、奥沙利铂单独处理、联合处理

- 检测指标：细胞活力、凋亡率、p53 核定位、XPO1 表达水平

 

关键数据：

- 联合处理组细胞存活率显著降低至 25-30%

- 凋亡率提高至 45-50%

- p53 核滞留比例增加 3 倍以上

- XPO1 表达水平下调 60%

 

结论：KPT-330 可通过促进 p53 核滞留有效逆转 HCT8/L 细胞的奥沙利铂耐药

 

案例二：ADAM17 敲低增加奥沙利铂敏感性

 

实验目的：研究 ADAM17 在 HCT8/L 细胞耐药中的作用

 

实验设计：

- 采用 shRNA 敲低 ADAM17

- 检测 EGFR-PI3K-AKT 通路活性

- 评估奥沙利铂敏感性变化

 

关键数据：

- ADAM17 敲低后，细胞增殖抑制率提高 40%

- 凋亡率增加 2.5 倍

- p-AKT 表达水平下降 55%

- IC₅₀ 值从 18.5 μmol/L 降至 4.2 μmol/L

 

结论：ADAM17 通过 EGFR-PI3K-AKT 通路介导 HCT8/L 细胞的奥沙利铂耐药

 

四、产品应用领域

 

4.1 耐药机制研究

- 奥沙利铂耐药相关基因功能验证

- 信号通路（如 EGFR-PI3K-AKT、Wnt/β-catenin、YAP）在耐药中的作用

- 表观遗传学调控机制研究

 

4.2 逆转耐药药物筛选

- 小分子化合物库筛选

- 天然产物活性评价

- 联合用药方案优化

 

4.3 生物标志物发现

- 耐药相关 miRNA、lncRNA 筛选

- 蛋白质标志物鉴定

- 预后标志物验证

 

五、参考文献

 

文献一：

标题：Exportin 1 inhibitor KPT-330 reverses oxaliplatin resistance via p53 nuclear retention in colorectal cancer

期刊：International Journal of Molecular Medicine

年份：2026

作者：Lai C, Jia X, Chen Y, Chen K, Wang F, Zhang Q, Xiang X, Chen ZS, Xu L, Dai S

简介：本研究探索了 KPT-330 与奥沙利铂在奥沙利铂耐药结直肠癌模型中的协同效应。奥沙利铂耐药细胞株（HCT116/L-OHP 和 HCT8/L-OHP）表现出 XPO1 表达升高。KPT-330 通过促进 p53 核滞留有效逆转耐药。

 

文献二：

标题：Wnt/beta-catenin signalling activates IMPDH2-mediated purine metabolism to facilitate oxaliplatin resistance by inhibiting caspase-dependent apoptosis in colorectal cancer

期刊：Journal of Translational Medicine

年份：2024

作者：Huang Y, Chan S, Chen S, Liu X, Li M, Zheng L, Dong Z, Yang Z, Liu Z, Zhou D, Zhang X, Zhang B

简介：研究发现 Wnt/β-catenin 信号通过激活 IMPDH2 介导的嘌呤代谢促进奥沙利铂耐药，机制为抑制 Caspase 依赖性凋亡。

 

文献三：

标题：Endothelin-1 Mediates Oxaliplatin Resistance via Activation of YAP Signaling in Colorectal Cancer

期刊：Oncology Research

年份：2025

作者：Yang R, Yuan D, Liang C, Zhu S, Huang J, Zhang Y, He W, Li Q, Zhang H

简介：阐明了内皮素-1（EDN1）通过激活 YAP 信号通路介导结直肠癌奥沙利铂耐药的机制。

 

六、产品优势

 

1. 耐药表型稳定：经过长期诱导，耐药特性稳定传代

2. 实验可重复性高：多篇文献验证，数据可靠

3. 应用场景广泛：适用于机制研究、药物筛选、标志物发现

4. 质量保障：安元生物科技（南京）有限公司提供，经严格鉴定

5. 技术支持：上海淳麦生物提供专业实验指导

 

七、联系我们

 

公司：上海淳麦生物科技有限公司

网站：www.shcmbio.com

电话：4006815880

地址：上海市浦东新区张江高科技园区

 

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