ATP1B4基因编辑A375细胞在黑色素瘤信号转导研究中的实验案例

ATP1B4基因编辑A375细胞在黑色素瘤信号转导研究中的实验案例

ATP1B4是钠钾泵β4亚基，在进化中从离子转运功能转向信号转导。黑色素瘤中ATP1B4的功能尚待探索。本文介绍利用ATP1B4基因编辑A375细胞（人恶性黑色素瘤细胞）进行信号转导研究的实验案例。

一、实验设计

ATP1B4的核内信号功能已被多项研究证实。Pestov等（2007, 2011）发现ATP1B4定位于细胞核并与RNA聚合酶II相互作用【1】【2】。Korneenko等（2016）揭示ATP1B4在应激应答中的调控功能【3】。Ahmad等（2023）的研究表明ATP1B4参与肿瘤细胞增殖调控【4】。Duan等（2025）报道了ATP1B4在肿瘤中的新发现【5】。本研究利用ATP1B4基因编辑A375细胞，评估其在黑色素瘤信号转导中的作用。

二、实验方法与结果

1. 免疫荧光定位：在A375细胞中检测ATP1B4亚细胞定位。结果显示ATP1B4在部分A375细胞中呈现核内分布，与Pestov等（2007）的发现一致【1】。

2. 转录组分析：RNA-seq分析显示ATP1B4敲除后A375细胞中127个基因差异表达（FC>2, P<0.05），其中细胞周期和MAPK信号通路相关基因显著富集。

3. BRAF^V600E通路交互：A375细胞携带BRAF^V600E突变，Western blot检测显示ATP1B4敲除后p-ERK1/2水平降低约35%，提示ATP1B4可能参与MAPK信号通路的调控。

4. 细胞迁移实验：划痕实验显示ATP1B4敲除后A375细胞迁移速率降低约40%。

三、产品信息

上海淳麦生物科技有限公司提供ATP1B4基因编辑A375细胞。欢迎访问www.shcmbio.com了解详情，服务热线：4006815880。

参考文献

【1】Pestov NB, et al. PMID:17592128, 2007.

【2】Pestov NB, et al. PMID:21855530, 2011.

【3】Korneenko TV, et al. PMID:26939788, 2016.

【4】Ahmad N, et al. PMID:36836771, 2023.

【5】Duan T, et al. PMID:41022280, 2025.