PANC1细胞ATP6V0D2基因过表达细胞株 | 胰腺癌V-ATPase功能研究应用方案

一、产品概述

PANC1细胞ATP6V0D2基因过表达细胞株是在人胰腺癌细胞系PANC1基础上，通过慢病毒介导的基因过表达技术构建的稳定细胞株。ATP6V0D2基因编码V-ATPase（空泡型H+-ATP酶）的d2亚基，该蛋白复合物在维持细胞内酸性微环境中发挥关键作用。研究表明，ATP6V0D2在多种肿瘤中表达异常，参与调控细胞侵袭、迁移、能量代谢等生物学过程。

二、技术方案

2.1 基因功能背景

ATP6V0D2是V-ATPase复合物V0结构域的d2亚基，负责质子转运功能。V-ATPase在溶酶体、内体等内膜系统中维持酸性微环境，在肿瘤细胞中常呈高表达状态。Yang等人研究显示，在KrasG12D驱动的癌细胞中，ATP6V0D2的mRNA和蛋白水平显著上调，其过表达在黑色素瘤、胰腺癌和肾癌组织中均被观察到（PMID: 30746744）。

2.2 构建策略

本细胞株采用慢病毒感染法将ATP6V0D2编码序列导入PANC1细胞，经嘌呤霉素筛选获得稳定过表达株。构建流程包括：基因克隆→慢病毒包装→感染PANC1细胞→抗生素筛选→单克隆扩大培养→STR鉴定及过表达验证。

2.3 验证方法

通过qRT-PCR检测ATP6V0D2 mRNA表达水平，Western blot验证蛋白过表达效果。细胞经STR鉴定确保细胞身份正确，支原体检测确保无污染。

三、实验案例

3.1 ATP6V0D2在食管癌中的促癌功能研究

Qi等人的研究揭示了ATP6V0D2在食管癌中的促癌作用。研究发现ATP6V0D2在3株食管癌细胞系中表达显著高于正常细胞系，且与患者不良预后相关。敲低ATP6V0D2后，E-cadherin表达显著增强，N-cadherin、Vimentin和MMP9表达降低；同时Cyclin D1、CDK4、Bcl-2蛋白水平下降，Bax水平上升。这表明ATP6V0D2通过调控EMT、细胞周期和凋亡相关标志物促进肿瘤发生（PMID: 32240421）。

3.2 ATP6V0D2在胶质母细胞瘤中的肿瘤抑制功能

Huang等人的研究发现，Halofantrine可通过上调ATP6V0D2诱导U251细胞发生细胞毒性自噬。在U251细胞中，ATP6V0D2敲低可抑制Halofantrine介导的细胞毒性自噬，而ATP6V0D2过表达则增强该效应。体内实验证实Halofantrine具有显著的抗胶质母细胞瘤活性（PMID: 42333554）。

3.3 Kras突变驱动的癌症中ATP6V0D2与能量代谢

Yang等人构建了KrasG12D敲入细胞模型，发现ATP6V0D2在KrasG12D驱动细胞中mRNA和蛋白水平显著上调。敲低ATP6V0D2可抑制KrasG12D驱动细胞的运动和侵袭能力。肿瘤组织微阵列分析显示ATP6V0D2在黑色素瘤、胰腺癌和肾癌组织中过表达，提示ATP6V0D2可能作为Kras突变癌症的潜在治疗靶点（PMID: 30746744）。

四、产品应用

1. 胰腺癌EMT机制研究：利用PANC1-ATP6V0D2过表达细胞株，研究ATP6V0D2对胰腺癌EMT过程的调控作用。

2. V-ATPase功能研究：探究V-ATPase D2亚基在细胞内酸碱平衡、溶酶体功能及肿瘤微环境中的作用。

3. Kras突变与能量代谢研究：结合Kras信号通路，分析ATP6V0D2过表达对胰腺癌细胞代谢重编程的影响。

4. 抗肿瘤药物筛选：以ATP6V0D2为靶点，筛选V-ATPase抑制剂或调控ATP6V0D2表达的小分子化合物。

5. 细胞侵袭与迁移实验：通过Transwell、划痕等实验验证ATP6V0D2对胰腺癌细胞运动能力的影响。

五、参考文献

[1] Yang J, Guo F, Yuan L, et al. Elevated expression of the V-ATPase D2 subunit triggers increased energy metabolite levels in KrasG12D-driven cancer cells. Journal of Cellular Biochemistry, 2019, 120(7): 11690-11701. 主要研究：ATP6V0D2在Kras突变癌症中的表达上调及其对细胞运动和侵袭的影响。

[2] Qi M, Liu DM, Ji W, et al. ATP6V0D2, a subunit associated with proton transport, serves an oncogenic role in esophagus cancer and is correlated with epithelial-mesenchymal transition. Esophagus, 2020, 17(4): 456-467. 主要研究：ATP6V0D2在食管癌中通过调控EMT促进肿瘤进展。

[3] Huang N, Tang K, Liu GQ, et al. Halofantrine Upregulates ATP6V0D2 and Induces Cytotoxic Autophagy in GBM Models. Current Pharmaceutical Design, 2026. 主要研究：Halofantrine通过上调ATP6V0D2诱导胶质母细胞瘤细胞毒性自噬。

六、产品信息

产品名称：PANC1细胞ATP6V0D2基因过表达细胞株

货号：ORC0154GO0246

规格：T25/冻存管

产品来源：上海淳麦生物科技有限公司

官方网站：www.shcmbio.com

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