细胞传代操作步骤

一、贴壁细胞传代

1. 1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。

2. 2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞。

3. 3.加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用。

4. 4.用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡。

5. 5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。

 

二、悬浮细胞传代

1. 1.将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min。

2. 2.弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液。

3. 3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
   
    

   人脐静脉细胞融合细胞	人	脐静脉；内皮细胞；A549融合；女性	DMEM	贴壁
   人羊膜细胞	人	宫颈癌；女性	EMEM	贴壁
   人正常前列腺上皮细胞	人	前列腺上皮；HPV18转化；男性	F12K/1640	贴壁
   人输尿管上皮永生化细胞	人	输尿管上皮；SV40转化；男性	F12K	贴壁
   人胚肾细胞	人	胚肾；5型腺病毒转化；女性	DMEM	贴壁
   人胚肾细胞	人	胚肾；5型腺病毒及SV40转化；女性	DMEM	贴壁
   人胚肾细胞	人	胚肾；5型腺病毒及SV40转化；女性	DMEM	贴壁
   人胚肾细胞	人
   人胚肾细胞	人	胚肾；5型腺病毒转化；女性	DMEM	贴壁
   人胚肺成纤维细胞	人	胚胎；肺；成纤维细胞；男性	F12K	贴壁
   人胚肺细胞	人	胚胎；肺；成纤维细胞；男性	DMEM	贴壁
   人胚肺细胞	人	胚胎；肺；成纤维细胞；女性	DMEM	贴壁
   人正常前列腺基质永生化细胞	人	前列腺基质；SV40转化；男性	DMEM	贴壁
   袋鼠肾细胞	长鼻袋鼠
   小鼠巨噬细胞	小鼠	巨噬细胞；J2逆转录病毒转染；C57BL/6	1640	悬浮
   小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14	小鼠	前骨细胞；自发永生；C57BL/6	EMEM	贴壁
   小鼠皮下结缔组织细胞	小鼠	皮下结缔组织；自发永生；雄性；C3H/An	1640	贴壁
   小鼠皮下结缔组织细胞	小鼠
   小鼠胚胎成纤维细胞	小鼠	胚胎；成纤维；自发永生；雄性；Swiss albino	DMEM	贴壁
   小鼠胚胎成纤维细胞	小鼠	胚胎；成纤维；自发永生；雄性；Swiss albino	DMEM	贴壁
   小鼠胚胎成纤维细胞	小鼠	胚胎；成纤维；自发永生；雄性；BALB/c	DMEM	贴壁
   小鼠胚胎肝细胞	小鼠	胚胎；肝；自发永生；BALB/c	DMEM	贴壁
   小鼠胚胎成纤维细胞	小鼠	胚胎；成纤维；自发永生；C3H	DMEM	贴壁

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